Tartu Ülikool Loodus- ja tehnoloogiateaduskond Keemia Instituut Kaieli Tohvert Orbretseptor GPR155 lokalisatsiooni määramine roti ajus in situ hübridi

Suurus: px
Alustada lehe näitamist:

Download "Tartu Ülikool Loodus- ja tehnoloogiateaduskond Keemia Instituut Kaieli Tohvert Orbretseptor GPR155 lokalisatsiooni määramine roti ajus in situ hübridi"

Väljavõte

1 Tartu Ülikool Loodus- ja tehnoloogiateaduskond Keemia Instituut Kaieli Tohvert Orbretseptor GPR155 lokalisatsiooni määramine roti ajus in situ hübridisatsiooni abil Magistritöö Juhendaja: PhD Ain Uustare Tartu 2013

2 1. Sisukord 1. Sisukord Kasutatud lühendid Sissejuhatus Kirjanduse ülevaade G-valguga seotud retseptorid Orbretseptorid GPR GPR155 mrna lokalisatsioon ja arvatavaid funktsioone In situ hübridisatsioon Uudistamisaktiivsuse määramine rottidel uudiskasti meetodil Immunohistokeemia Praktiline osa Materjalid Riboproovid Loomade selekteerimine uudiskasti meetodil Ajude perfuseerimine paraformaldehüüdiga ja lõikamine In situ hübridisatsioon ujuvlõikudel Tulemused Kontrollkatse Sõelung läbi kogu roti aju Võrdlus Immunohistokeemiast saadud tulemustega GPR155 lokalisatsiooni erinevused kõrge ja madala uudistamisaktiivsuse korral Arutelu Kokkuvõte Kasutatud kirjandus Localization of orphan receptor GPR155 in rat brain with in situ hybridization Lisad Lihtlitsents lõputöö reprodutseerimiseks ja lõputöö üldsusele kättesaadavaks tegemiseks

3 2. Kasutatud lühendid BM purple ingl.k. alkaline phosphatase substrate, precipitating ehk aluselise fosfataasi sadenev substraat BR ingl.k. blocking reagent ehk blokeerimis reagent DIG digoksügeniin GPR155 G-valguga seotud retseptor 155 MQ MilliQ vesi, ultrapuhas vesi tüüp 1 NTMT ingl.k. alkaline phosphatase buffer ehk aluselise fosfataasi puhver (NaCl-Tris-Cl- MgCl 2 -Tween20) PBS ingl k. phosphate buffered saline ehk fosfaatpuhverdatud soolalahus PFA paraformaldehüüd RNA ribonukleiinhape SSC ingl.k. saline sodium citrate ehk naatriumtsitraadi soolalahus SDS naatriumdodetsüülsulfaat TBST ingl.k. Tris buffered saline with Tween ehk TRIS-puhverdatud soolalahus Tweeniga TRIS 2-amino-2-(hüdroksumetüül)-1,3-propaandiool 3

4 3. Sissejuhatus G-valguga seotud retseptorid on üks kõige suuremaid retseptorite perekondi. Olles märklauaks paljudele ravimitele, pakuvad G-valguga seotud retseptorid laialdast huvi. Samas leidub nende hulgas palju selliseid retseptoreid millele pole veel tuvastatud aktivaatoreid. Selliseid ligandita retseptoreid kutsutakse orbretseptoriteks ja nende uurimine ja neile sobivate ligandide leidmine on järjest populaarsem. Esimeseks sammuks sobiva ligandi leidmisel on orbretseptori asukoha tuvastamine organismis. Antud töös sellest etapist juttu tulebki. Käesolevas magistritöös antakse lühiülevaade nii G-valguga seotud retseptorite, orbretseptorite kui ka G-valguga seotud retseptor 155 (GPR155) kohta. Samuti käsitletakse erinevaid meetodeid retseptorite lokaliseerimiseks roti ajus, ning antakse ülevaade käitumisomaduste uurimisvõimalusest uudiskasti testiga. Käesoleva töö põhirõhk on GPR155 lokalisatsiooni tuvastamisel in situ hübridisatsiooni abil. Töö eksperimentaalne osa keskendub tehtud katsetele, mille eesmärk oli lokaliseerida GPR155 lokalisatsioon roti ajus, mille alusel saaks edaspidi tuvastada võimalikke funktsioone. 4

5 4. Kirjanduse ülevaade 4.1 G-valguga seotud retseptorid G-valguga seotud retseptorid (GPCR) on transmembraansete valkude klass, mis osalevad keemilisel signaali ülekandel rakumembraanil. Endogeensetele signaalidele reageerivate GPCR-de hulgas on suur hulk retseptoreid, mille kuulumine sellesse klassi on oletatud vastava geeni järjestusest, aga millele vastavat endogeenset aktiveerijat (agonisti) pole leitud. Neid nimetatakse orbretseptoriteks, aastal 2006 oli orbretseptorite hulk umbes 120 (Oh et al. 2006). IUPHAR nomenklatuuri järgi jagatakse GPCR-d kolme perekonda: A, B ja C. Perekonna B võib jagada kaheks küllaltki suure erinevusega grupiks sekretiinilaadseteks retseptoriteks, mille hulka kuuluvad mitmesuguseid peptiidseid hormoone siduvad retseptorid ja adhesiooniretseptoriteks, mille ligandid ja signaaliülekandetee on ebaselged (Fredriksson et al. 2003). GPR155 on (mrna järjestuse põhjal) oletatud kuuluma perekonda B; järjestus on rohkem homoloogiline adhesiooniretseptorite grupiga (Vassilatis et al. 2003), kuid homoloogia on siiski väga väike, et GPR155 sellesse gruppi kuuluvaks liigitada (Oh et al. 2006). Kuna GPR155-le pole leitud endogeenset aktiveerijat on tegemist orbretseptoriga. 4.2 Orbretseptorid Olgugi, et G-valguga seotud retseptoreid on väga palju pole kõigile neile veel leitud kehaomaseid ligande. Selliseid ligandita retseptoreid nimetatakse orbretseptoriteks. Orbretseptorite kuulumine G-valguga seotud retseptorite klassi on määratud geenijärjestuse põhise homoloogia alusel (Im 2002). Homoloogia järgi võib orbretseptori lugeda teatud klassi kuuluvaks kui vähemalt 40% järjestusest on sarnane antud gruppi kuuluvate retseptoriga. Retseptorid vastutavad erinevate signaalide jõudmise eest sihtkohtadesse. Üldjuhul on võimalik uurida retseptorite poolt vahendatud signaaliülekannet kasutades selleks antud retseptoritele omaseid ligande ehk siis kas aktiveerijaid või deaktiveerijaid. Kuna orbretseptoritele pole veel tuvastatud endogeenseid ligande ja samuti puudub info nende funktisoonide kohta, peetakse neid potentsiaalseteks ravimimärklaudadeks. Selletõttu pälvib 5

6 deorvustamine ehk endogeensete aktiveerijate leidmine järjest enam tähelepanu. (Civelli et al. 2006, Ma et al. 2002). 4.3 GPR155 G-valguga seotud retseptor 155 (GPR155) on üks kõige vähem uuritud orbretseptoreid. GPR155 uurimise kohta on vaid mõned kirjandusviited, mis seovad seda autismi, UVkiirgusest tingitud kasvajate ja parasiitide poolt põhjustatud põletikega (Nishimura et al. 2007, Hacker et al. 2008, Albuquerque et al. 2009). GPR155 (alias PGR22) on membraani läbiv valk ning geeni homoloogia põhjal liigitatakse see G-valguga seotud retseptorite hulka (GPCR). G-valguga seotud retseptorite hulgas liigitatakse GPR155 homoloogia põhjal sekretiini laadsete retseptorite hulka. Sekretiini laadsed retseptorid vastutavad näiteks põhiliste füsioloogiliste funktsioonide nagu ekso- ja endokriinne sekretsioon reguleerimise, toitumisharjumuste, metabolismi, kasvu ja neuromodulatsioonide eest. (Neumann et al. 2008) GPR155 geeni pikkus on 4810 aluspaari ( Roti ja hiire GPR155 aminohappeline järjestus on 95% ulatuses sarnane (Trifonov et al. 2010). 4.4 GPR155 mrna lokalisatsioon ja arvatavaid funktsioone RT-PCR meetodil määrati GPR155 ekspressiooni mitmetes ajuosades. GPR155 ekspressiooni leiti hüpotaalamuses, amügdalas (mandelkeha), ajutüves, väikeajus, ajukoores, frontaalkoores, hippokampuses, juttkehas ja taalamuses. Kõige kõrgem mrna tase leiti juttkehas ja taalamuses (Vassilatis et al. 2003). Kahte viimast ajuosa seostatakse motivatsiooni ja hüvekäitumisega. Kuid GPR155 ei ekspresseeru ainult ajus, antud uuringus näidati selle geeni ekspressiooni ka perifeersetes kudedes (sh soolestik, neerud, kopsud, munasarjad, eesnäärme, nahk, magu ja emakas). Lisaks on leitud otsene seos GPR155 düsregulatsiooni ja autismi vahel. Autismi spektri häiritega loomadel on antud orbretseptori ekpressioon düsreguleeritud erinevalt loomadest, kellel antud häireid pole. (Nishimura et al. 2007). Siiani on kaardistatud GPR155 asukohad hiire ajus (Trifonov et al. 2010) 6

7 Orbretseptor GPR155 sattus meie huviorbiiti seoses depressiooni loommudelite uurimisega. Loommudelina kasutati Wistar tõugu rotte, kes olid eelnevalt jagatud uudistamisaktiivsuse järgi gruppideks. Uudistamisaktiivsus määrati nn uudiskasti testis (vt allpool), kus Wistari liini rotid jagunevad selgelt rohkem (HE) ja vähem (LE) uudistavateks isenditeks, kusjuures vähem uudistavad rotid näitavad ülesse ärevamat käitumist mõnedes stressirohketes katsetes ning erinevad HE-rottidest ka hedoonilistele elamustele vastuvõtlikkuse kontekstis (Mällo et al 2007). Uudiskasti meetodil selekteeritud rottide geenide ekspressioonimustri analüüsil mrna kiibil leiti, et orbretseptor GPR155 mrna hulk erineb oluliselt LE ning HE rottide vahel erinevates ajuosades (hipokampuses, raphe tuumas). Lisaks nähti väiksemaid muutusi veel mitme orbretseptori ja serotonergilise signaaliülekande komponentide ekspressioonitasemes (Projekti Newmood publitseerimata andmed). Lisaks avaldamata andmetele orbretseptorit GPR155 kohta, uuritakse seda retseptorit järjest rohkem. 4.5 In situ hübridisatsioon In situ hübridisatsioon põhineb komplementaarse RNA-proovi (riboproovi) seostumisel koelõigus olevale retseptori mrnale. Seotav RNA proov on märgistatud antikehade poolt äratuntava fragmendiga, mis võimaldab hiljem seotunud mrna värvireaktsiooni abil lokaliseerida. Lisaks antikehade poolt äratuntavale kasutatakse märgistamiseks digoksügeniinile riboproovide radioaktiivsete isotoopidega märgistatud proove. Digoksügeniiniga (DIG) märgistamise eeliseks räägib see, et pole vaja töötada radioaktiivsusega ja fakt, et seda toodetakse taimsest allikast (sõrmkübaralistest). Taimsest allikast pärit märgise korral on Joonis 1: Skemaatiline in situ hübridisatsiooni toimumine. Sihtmärgiks olevale RNA-le seostub sellega komplemantaarne mrna, millele on seotud digoksügeniin märgis (ülemine pool). Peale ahelate seostumist seotakse digoksügeniinile antikeha, millel on aluseline fosfataas küljes, ja tehakse antikeha asukoht kindlaks aluselisele fosfataasile mõjuva substraadiga. 7

8 välditud taustaprobleemid teiste organismide rakkudes (Braissant et al 1998, Hart et al 2009). In situ hübridisatsiooni kasutatakse laialdaselt erinevate retseptorite asukoha tuvastamiseks. Eriti leiab see meetod kasutust orbretseptorite korral, kus on teada neist vaid geeni järjestus.(farquharson et al 1990) Joonisel 1 on toodud in situ hübridisatsiooni toimumine skemaatilisel. Olemasolevale sihtmärk RNA-le seostub sellega komplementaarne riboproov, mille küljes on antikehade poolt äratuntav märgis (antud juhul digoksügeniin). Märgisele omakorda seostub katse käigus aluselise fosfataasiga konjugeeritud antikeha, mis muudetakse nähtavaks aluselise fosfataasi substraadi abil. In situ hübridisatsiooni läbiviimine eksperimentaalselt on võimalik kahel erineval viisil. Esimene variant on teostada katse klaasidele (mikroskoobi slaidid) kinnitatud proovidega (lõikudega), teine võimalus on kasutada ujuvlõikude meetodit. Esimest varianti kasutatakse juhul kui katseobjekt on äärmiselt väike ning selle leidmine katseplaadilt on keerukas (näiteks hiire munasarjad). Kui aga uuritav objekt on vähegi suurem (näiteks hiirte või rottide ajud) on ujuvlõikude meetod igati teretulnud. Viimane võimaldab läbi töödelda korraga suuremat hulka proove ja katse teostamine katseplaadil on tehtud võimalikult lihtsaks. Lisaks on mõlemad meetodid omavahel võrreldavad mõlema puhul toimub lõpilik analüüs mikroskoobi klaasidel olevate proovidega. Antud töös kasutati ujuvlõikude meetodit. (Trifonov et al 2009, 2010, 2012, Braissant et al 1998, Owens et al 2006). Joonis 2: Joonisel on kõrvutatud 12-süvendiga katseplaati ja mikroskoobi slaidi. 12-süvendiga katseplaadi puhul on võimalik korraga läbi töödelda suurem kogu proove. 8

9 4.6 Uudistamisaktiivsuse määramine rottidel uudiskasti meetodil Öeldakse, et niipalju kui on erinevaid inimesi on ka erinevaid iseloome. Sama võib ka väita käitumise ja rottide kohta. Käitumuslikke erinevusi täheldati rottidel juba ammu. Selliseid käitumiserinevusid uurides arendati välja mitmed meetodid käitumisparameetrite kirjeldamiseks. Üheks selliseks on ka Otteri poolt kirjeldatud uudiskasti meetod rottide uudistamisaktiivsuse määramiseks. (Otter et al. 1997) Meetodi ülesehitus on lihtne. Rott pannakse uudiskasti (koosneb kahest osast: avarväli ja kinnine pesakast) ja jälgitakse tema käitumist 15 minuti jooksul. Joonis 3: Joonisel on uudiskast. paksema joonega ümbritsetud ala on avarväli, mida rott uudistama hakkab. Parempoolne peenikese joonega kast on pealt kinnine pesakast kuhu rott katse alguses pannakse. Avarväljal on ka 3 objekti: klaaspudel (1), toidugraanul (2) ja puupulk (3). Kuna uudiskasti puhul on tegemist uudse keskkonnaga rotile ongi võimalik jälgida tema uudistamisaktiivsust. Roti vaatluse juures märgitakse üles järgmisel näidud: pesast väljumiseks kulunud aeg, avarväljal veedetud aeg, objektide uudistamine, tõus tagakäppadele ja ületatud joonte arv. Vastavalt saadud tulemustele jagatakse rotid kahte gruppi HE ja LE. HE high exploratory ehk kõrge uudistamisaktiivsus ja LE low exploratory ehk madal uudistamisaktiivsus. Kõrge uudistamisaktiivsusega rotti iseloomustavad järgmised omadused: aktiivne, uudishimulik. Madala uudistamisaktiivsusega rotti iseloomustab aga arglikkus. (Otter et al 1997, Mällo et al 2006) 4.7 Immunohistokeemia Immunohistokeemia põhineb antikeha seondumisel koelõigul paiknevale spetsiifilisele antigeenile, milleks on immunohistokeemia puhul valgu fragmendi struktuur. Ehk siis on immunohistokeemia abil võimalik tuvastada kus asub konkreetne valk. Immunohistokeemia 9

10 on kasutusel erinevate valkude (sh G-valk seotud retseptorite) asukoha tuvastamiseks nii koe kui ka raku tasandil, andes olulist informatsiooni retseptorite lokalisatsiooni ja haiguste omavaheliste suhete defineerimisel. Immunohistokeemia ühendab endas kolme erinevat valdkonda: immunoloogia, histoloogia ja keemia. Antud töös kasutati lokaliseerimisandmeid ka immunohistokeemia meetodil teostatud katsetest. Need andmed on kirjeldatud 2012 aastal Kairi Tõnsau bakalaureusetöö: Orbretseptor GPR155 lokalisatsiooni uurimine immunohistokeemiaga. Kasutatud andmed on saadud järgneva skeemi alusel. Joonis 4: Skemaatiline ülevaade immunohistokeemia katse toimumise kohta. Uuritavale valgule seostub sinna disainitud primaarne antikeha, millele omakorda seostub sekundaarne antikeha (fluorestsents märgisisega). Märgis võimaldab määrata otsitava valgu asukohta ajus. 10

11 5. Praktiline osa 5.1 Materjalid Katseteks kasutatud materjalid on pärit järgmistest allikatest. Riboproovid sünteesis Tõnis Örd Eesti Biokeskusest. Naxo SSC, PBS, zelatiin ja TritonX-100, AppliChem PFA, Tris, NaCl ja MgCl 2. Invitrogen Salmon sperm DNA, Roche Blocking Reagent (BR), BM purple ja DIG-antikeha. Ferax Berlin Tween20, KEBO SDS, Algol Pharma Oy Pertex, Serva sahharoos ja Nunc 12-wellid. 5.2 Riboproovid GPR155 lokaliseerimiseks roti ajus kasutati GPR155 mrna-ga komplementaarset RNA proovi (riboproov Antisense - AS) GPR155 geenile. Proovi valmistamisel kasutati kogu GPR155 cdna ulatust, st ahelad ühinevad vaid juhul kui tegemist on terve retseptoriga, mitte ainult osaga sellest. cdna eraldamisel teostati ka sekveneerimine veendumaks, et tegemist on ikka soovitud retseptoriga. Saades cdna õigsuse kinnituse valmistati 2 RNA proovi Antisense ja Sense. Antisense ehk põhiproov ja Sense ehk kontrollproov. Viimane on komplementaarne Antisense prooviga kuid mitte retseptori mrna-ga. Riboproovid sünteesis Tõnis Örd. 5.3 Loomade selekteerimine uudiskasti meetodil Selekteerimise katsetes kasutati isaseid Wistar liini rotte. Enne katse alustamist viidi katseloomad eraldi ruumi ning lasti neil tund aega ruumiga kohaneda. Kõik loomad kaaluti ja märgistati enne katse algust. Uudistamistesti alguses asetati loom uudiskasti küljes olevasse pesakasti ja jälgiti tema tegevust 15 minuti vältel. Kirja pandi järgmised parameetrid: aeg, mis kulus loomal kõigi nelja käpaga avarväljale tulemiseks, avarväljale ilmumiste arv, väljal asuvate joonte ületmised, tagakäppadele tõusud, väljal tundmatute objektide uudistamiste arv ja kogu avarvälja veedetud aeg 15 minuti jooksul. Katset korrati järgmisel päeval. Kahe päeval saadud tulemusi summeerides saadud väärtustest jagati loomad kõrge ja madala uudistamisaktiivsuse järgi. Korraga selekteeriti suurem hulk loomi, mitmeks erinevaks katseks. Seetõttu kasutati analüüsiks kõikide loomade uudiskastist 11

12 saadud andmeid. Kõrge uudistamisaktiivsusega loomadel oli objektide uurimisi keskmisel 200 ringis, madalatel aga alla 30. Avarväljal veedetud ajad olid vastavalt 12 minutit kõrge ja 2 min madala uudistamisaktiivsuse korral. 5.4 Ajude perfuseerimine paraformaldehüüdiga ja lõikamine Loomad pandi sügavasse narkoosi (fenobarbitaal 100mg/kg), looma südamesse sisestati kanüül ning läbi selle lasti kõigepealt Krebs-Ringeri lahust (118,4mM NaCl, 4,7mM KCl, 2,52mM CaCl 2, 1,18mM MgSO 4, 25,01mM NaHCO 3 ja 1,18mM KH 2 PO 4 ), et pesta veresoonkonnast ja ajust välja veri. Peale vere väljumist lasti kanüüli mööda roti organismi 4% paraformaldehüüdi lahust. Joonis 5: Joonisel on roti skemaatiline perfuseerimine paraformaldehüüdiga. Pildi allikas: Peale perfuseerimist eemaldatakse aju ja viiakse 20% sahharoosi lahusesse ning hoitakse 4 o C juures üleöö (või seni kuni aju enam lahuse pinnal ei hõlju). Peale sahharoosi lahuses seismist kiirkülmutatakse aju kuiva jää ja isopentaaniga ning säilitatakse lõikamiseni -80 o C juures. Katse päeval lõigatakse ajust mikrotoomiga 40μm paksused lõigud. Mikrotoomil kasutatavad parameetrid on -20 o C noa ja kambri temperatuur ja -25 o C proovi temperatuur. 12

13 5.5 In situ hübridisatsioon ujuvlõikudel Ujuvlõikudel teostatav in situ hübdridisatsiooni katse jaotati kolmele erinevale päevale. Katsete läbiviimisel kasutati järgnevaid lahuseid: fosfaatpuhverdatud soolalahus (PBS), naatriumtsitraadi soolalahus (SSC), Tris-puhverdatud soolalahus (TBST) ja aluselise fosfataasi puhver (NTMT). PBSi kasutati puhverlahusena ph hoidmiseks katsekeskkonnas. SSC-i kasutati hübridiseerimis puhvrina tagamaks samaväärsus erinevate pesuetappide vahel. NTMT-i kasutati kudede tasakaalustamiseks aluselise fosfataasi sadeneva substraadi kasutamise eel. Järgnevalt päevadepõhine lühiülevaade. Päev 1 - Lõigati 40µm ajulõigud wellidesse (1xPBS jääl). Loputati lõike 1xPBS/0,25% TritonX-100 lahusega 15 minutit ja 5xSSC (ph=5,0) loputati ca 5 min, kõik etapid peale lõikamise viidi läbi loksutil (kõigutil). Peale loputusi viidi lõikudele peale prehübridisatsiooni lahus (MQ, formamiid ja SSC) ja loksutati 65 o C juures 1,5h. Prehübridisatsiooni lõppedes alustati hübridisatsiooniga (prehübridisatsiooni lahusele lisati mrna-proov (1μg/ml), lõhe sperma DNA(10mg/ml) ja 2% blocking reagent) ning inkubeeriti 65 o C juures üleöö. mrna proov oli märgistatud digoksügeniiniga (DIG). Päev 2 Loputati, kahe loputusega, ajulõikudelt maha mrna proovide jäägid: esimene loputus (50% formamiid; 5xSSC ph=5.0; 1% SDS) 30 min 65 o C ja teine loputus (50% formamiid; 2xSSC ph=5.0) kaks korda 30 min 65 o C. Seejärel loputati kolm korda 1xTBSTga ja alustati blokeerimisega (2% Bloking Reagent (BR)/1xTBST) 1,5h. Misjärel teostati antikeha inkubatsioon (lahjendusega 1:2000 1xTBST puhvris 1% BR-iga) 4 o C juures üleöö. Antikeha oli konjugeeritud aluselise fosfataasiga. Päev 3 - Pesti ajulõikudelt maha antikeha inkubatsiooni jäägid (1xTBST 3 korda 5min ja 2 korda 1h) ja tasakaalustati lõigud NTMT puhvriga (100mM Tris-HCl ph=9,5, 100mM NaCl, 50mM MgCl 2, 0,1% Tween20) 2x 10 min. Digoksügeniiniga märgitud mrna tehti nähtavaks BM purple iga. BM-purple lahus on aluselise fosfataasi sadenev substraat. Lahus pipeteeriti lõikudele ja jäeti 24h toatemperatuurile inkubeerima. Peale värvireaktsiooni ilmumist loputati (1xPBS) ning kanti lõigud 0,5% zelatiini lahusega mikroskoobi klaasidele, lastakse kuivada ja kaetakse mikroskoobi slaidid katte meediumiga (Pertex) ning asetatakse peale katteklaasid. Valmis preparaate vaadeldi TILL Photonics HCS (high content screening) mikroskoobiga ja pildistati Andor Clara DR kaameraga, kasutati 4x suurendusega objektiivi. Peale 13

14 ajulõikude pildistamist vaadeldi ja vajadusel töödeldi saadud pilte programmidega ImageJ ja GIMP Ajupiirkondade täpseks tuvastamiseks kasutati Paxinos e ja Watson i The Rat Brain In stereotaxic coordinates ajuatlast. (Paxinos ja Watson 1998) 14

15 6. Tulemused 6.1 Kontrollkatse Enne kogu roti aju skanneerimist teostasin sünteesitud riboproovide kontrollkatse. Eesmärgiks oli veenduda, et tulemusi annab ainult Antisense proov. Proovide kontrolli katse tulemused olid järgnevad. Joonis 6: Vasakult vaadates Antisense (AS), Sense (S) ja O-proovid (0). nähtava märgistuse andis AS-iga tethud katse. Antud lõikude puhul vaatlesin hipokampuse märgistust (punane nool). Skaala 1mm. Järgmisel joonisel (7) on toodud hipokampuse ala suuremana kui üldpildil (joonis 6). 15

16 Joonis 7: Hipokampuse (punane nool) ala suuremalt. AS proovi korral on näha märgistus hipokampuse alal, S ja 0 proovide korral märgistust näha pole. Sinised nooled tähistavad ajulõikude kattumist/volte. Skaala 1mm. Esialgse katse põhjal, mis sai sooritatud kontrollimaks, kas sünteesitud riborpoovid töötavad, võib järeldada, et riboproovid on töökorras. Samas ilmnes ka ajulõikude klaasidele kandmisel mõningate voltide/kattumiste teket, joonisel 7 on viimane tähistatud siniste nooltega. Antisense riboproov andis konkreetse märgistuse, mida oli ka oodata. 16

17 6.2 Sõelung läbi kogu roti aju Järgnevate katsetega sooritati sõelung läbi kogu roti aju lõigatud proovidele ja antud tulemustest toon välja vaid antisense prooviga tehtud osa. Teised proovid (Sense ja 0-proov) olid kontrolliks. Vähesel määral esines märgistust nii juttkehas, corpus callosum, anterior commissure s, väikeaju kurdudes ja mõnedes väiksemates ajuosades. Kõige selgepiirilisem märgistus esines aga hipokampuse alal. Järgmiste jooniste peal on näha nii lokalisatsiooni tuvastust kui ka asukohta roti ajus. Piltidele on lisatud väljavõtted Paxinos ja Watson ajuatlasest. Joonis 8: Eesaju. GPR155 lokalisatsiooni on näha indusium griseum'is (1). Rohelise kastiga ümbritsetud piirkond on paremal pool toodud välja suuremana. Skaala 1mm 17

18 Joonis 9: Eesaju - enne hipokampuse ala. Pildid puudub tuvastatav märgistus. GPR155 mrna leidumine vähetõenäoline. Skaala 1mm. Joonis 10: Kõige selgepiirilisem märgistus on hipokampuse alades (1), märgitust on näha ka kahvakeras (globus pallidus) (2) ja optilises juhas (optic tract) (3). Skaala 1mm. 18

19 Joonis 11: Keskaju. Joonisel on näha märgistust hipokampuse tagumises osas (1,2) ja mammillary peduncle(3) Joonis 12: Väikeaju. Joonisel on näha märgistust väikeaju kurdudes (nooled 1). Skaala 1mm. Katses tuvastatud GPR155 mrna lokalisatsiooni esines roti ajus. Kõige selgepiirilisemalt oli lokalisatsioon tuvastatav hipokampuses. Hipokampus on seotud erinevate mäluprotsessidega vahendamisega (Eichenbaum 2004), millest võib järeldada, et ka GPR155 osaleb mingeid radu pidi nendes. Märke GPR155 lokalisatsioonist leidus ka väikeaju kurdudes, ajukoores, globus pallidus ses, indusium griseum ja optilises juhas. 19

20 6.3 Võrdlus Immunohistokeemiast saadud tulemustega Samuti teostasin GPR155 mrna ja immunohistokeemia põhjal tehtud lokalisatsioonide kokkulangevuse võrdluse. Joonisel 11 on toodud võrdluseks kõrvuti eesajus asuvad juttkeha piirkond ja ajukoor. Immunohistokeemia puhul esines tugevat märgistust nii juttkehas kui ka ajukoores, in situ hübridisatsiooni korral oli märgitus juttkehas vaevumärgatav. Joonis 13: Joonisel on toodud in situ hübridisatsiooni ja immunohistokeemia võrdlus. Vasakul hübridisatsioon, paremal immunohistokeemia. Tegemist on eesaju piirkonnaga. Noolte 1 (ajukoor) ja 2 (juttkeha) juures on immunohisto. korral näha märgistust, in situ korral aga mitte. noolte 3 (indusium griseum) korral on aga mõlema meetodi korral näha märgistust järelikult on olemas nii mrna kui ka valk. Skaala 1mm. 20

21 Joonis 14: Joonisel on toodud in situ hübridisatsiooni ja immunohistokeemia võrdlus. Vasakul hübridisatsioon, paremal immunohistokeemia. Tegemist on keskaju piirkonnaga. Kõige selgepiirilisem märgistus on mõlema meetodi korral hipokampuse alades (1), in situ hübridisatsiooni ja immunohistokeemia korral on märgitust näha ka kahvakeras (globus pallidus) (2) ja optilises juhas (optic tract)(3). Skaala 1mm. Joonis 15: Joonisel on toodud in situ hübridisatsiooni ja immunohistokeemia võrdlus. Vasakul hübridisatsioon, paremal immunohistokeemia. Tegemist on väikeaju piirkonnaga. Mõlema meetodi korral on näha märgitust väikeaju kurdudes (1). Skaala 1mm. 21

22 Nii immunohistokeemia kui ka in situ hübridisatsiooni katse kinnitasid GPR155 mrna leidumist hipokampuse alal (Joonis 13). Mõlema meetodiga saadud tulemuste kokkulangevusel võib järeldada, et hipokampuse aladel leidub nii GPR155 mrna-d kui on ekspresseeritud ka retseptor. Samasuguse asukohaga märgistust andsid ka väikeajus asuvad kurrud (joonis 14). Samas aga ei näidanud in situ hübridisatsioon GPR155 mrna-d juttkehas ja pararubral nucleus, kuid immunohistokeemia näitas. 6.4 GPR155 lokalisatsiooni erinevused kõrge ja madala uudistamisaktiivsuse korral Meist mitte tulenevatel põhjustel ei olnud võimalik saada korralikke proove analüüsimaks GPR155 mrna lokalisatsiooni kõrge ja madala uudistamisaktiivsusega loomadel. Loomadelt eraldatud ajusid ei fikseeritud paraformaldehüüdis ja sahharoosis, enne kiirkülmutamist, mistõttu lõikamisel lõigud lagunesid. 22

23 7. Arutelu Käesoleva magistritöö raames teostatud katsete eesmärgiks oli orbretseptor GPR155 lokalisatsiooni uurimine in situ hübridisatsiooni meetodil roti ajus. In situ hübridisatsiooni teostamiseks disainiti GPR155 cdna vastu riboproov. Riboproovi õigsust kontrolliti sekveneerimise teel. Sekveneerimine kinnitas eraldatud proovi õigsust. Riboproov märgistati digoksügeniiniga, see võimaldas riboproovi asukohta hiljem proovides tuvastada. In situ hübridisatsiooniga saadi infot GPR155 lokalisatsiooni kohta järgmistes piirkondades: hipokampus, ajukoor, väikeaju, veejuha ümbruses, globus pallidus, optiline juha ja indusium griseum. Kõige selgepiirilisemalt oli lokalisatsioon tuvastatav justnimet hipokampuses ja väikeajus. Töö käigus võrreldi saadud tulemusi ka immunohistokeemia meetodit kasutades saadud tulemustega. Immunohistokeemiast saadud tulemused ühtisid in situ hübridisatsiooni omadega järgmistes ajuosades: hipokampus, ajukoor, väikeaju, indusium griseum, globus pallidus. Kuid immunohistokeemia tuvastas GPR155-i ka juttkehas, pararubral nucleus s ja keskse veejuha ümbruses. Antud töös tuvastati kõige kõrgem ekspressioon väikeajus ja hippokampuses. Väikeaju seostatakse motoorikaga, kuid ta osaleb ka iseloomu ja tujude mõjutamisel. Hipokampus aga on seotud emotsioonide, ruumitaju ja mäluprotsessidega. In situ hübridisatsiooni ja immunohistokeemia meetodidel saadud tulemused on kokkulangevad mõnedes ajuosades. Tulemuste täpsuse kohapealt peaks eelistama pigem in situ hübridisatsiooniga saadud andmeid kuna meetod ise tuvastab kogu GPR155 RNA-d, immunohistokeemia puhul aga tuvastatakse osa GPR155-le vastavast valgust. Töö käigus tuli välja ka koeproovide spetsiaalse eeltöötluse olulisus. Käitumiskatsetes mitte osalenud loomade ajud fikseeriti paraformaldehüüdi ja sahharoosiga. Ilma fikseeriva eeltöötluseta koerproovid lagunesid aga enne katse algust (peale mikrotoomil lõikamist katsepuhvrisse viimisel). 23

24 8. Kokkuvõte Käesoleva töö eesmärgiks oli uurida orbretseptori GPR155 lokalisatsiooni terve roti aju ulatuses. GPR155 mrna paiknemine ajus tuvastati in situ hübridisatsiooni abil, tulemusi võrreldi vastava valgu lokalisatsiooni määramise tulemustega immunohistokeemia abil. Katsete tulemusena leiti GPR155 mrna-d hipokampuses, väikeajus, ajukoores, veejuha ümbruses, globus pallidus s, optilises juhas ja indusium griseum s. Kõige selgepiirilisem lokalisatsioon saadi hipokampusest ja väikeajust. Antud tööst saadud tulemusi kinnitas võrdlus sama orbretseptori valgu lokalisatsiooni immunohistokeemiliste uuringute tulemustega. Mõlema meetodiga leiti GPR155-te hipokampusest ja väikeajust. In situ hübridisatsioonil saadud tulemused võiksid olla täpsemad kuna RNA-proovi seostumine on kõrgema spetsiifilisusega kui antikeha seostumine. RNA tuvastamisega. Töö tulemusena kirjeldati GPR155 mrna esinemine erinevates roti ajupiirkondades. 24

25 9. Kasutatud kirjandus Albuquerque SS, Carret C, Grosso AR, Tarun AS, Peng X, Kappe SH, Prudêncio M, Mota MM. (2009) Host cell transcriptional profiling during malaria liver stage infection reveals a coordinated and sequential set of biological events. BMC Genomics. 10:270. Braissant O, Wahli W. (1998) A Simplified In Situ Hybridization Protocol Using Nonradioactively Labled Probes to Detect Abundant and Rare mrnas on Tissue Sections. Biochemica. 1:10-16 Civelli O, Saito Y, Wang Z, Nothacker H-P, Reinscheid R.K. (2006) Orphan GPCRs and their ligands. Pharm. & Therap.110: Eichenbaum H. (2004) Hippocampus: Cognitive Processes and Neural Representation that Underlie Declarative Memory. Neuron. 44: Farquharson M, Harvie R, McNicol A.M. (1990) Detection od messenger RNA using a digoxigenin end labelled oligodeoxynucleotide probe. J Clin Pathol 43: Fredriksson R, Lagerström MC, Lundin LG, Schiöth HB. (2003) The G-protein-coupled receptors in the human genome form five main families. Phylogenetic analysis, paralogon groups, and fingerprints. Mol Pharmacol. 63(6): Hacker E, Muller K, Whiteman DC, Pavey S, Hayward N, Walker G. (2008) Reduced expression of IL-18 is a marker of ultraviolet radiation-induced melanomas. Int J Cancer. 123: Hart S.M., Basu C. (2009) Optimization of a Digoxigenin-Based Immunoassay System for Gene Detection in Arabidopis thaliana. J of Biomol Techiques. 20: Im D-S. (2002) Orphan G Protein-Coupled Receptors and Beyond. Jpn. J. Pharmacol. 90: Mällo T, Alttoa A, Kõiv K, Tõnissaar M, Eller M, Harro J. (2007) Rats with persistently low or high exploratory activity: Behaviour in tests of anxiety and depression, and extracellular levels of dopamine. Beh Brain Res. 177: Neumann J-M, Couvineau A, Murail S, Lacapere J-J, Jamin N, Laburthe M. () Glass-B GPCR activation: is ligand helix-capping the key? Trends in Biochem. Sciences 33(7):

26 Nishimura Y, Martin CL, Vazquez-Lopez A, Spence SJ, Alvarez-Retuerto AI, Sigman M, Steindler C, Pellegrini S, Schanen NC, Warren ST, Geschwind DH. (2007) Genome-wide expression profiling of lymphoblastoid cell lines distinguishes different forms of autism and reveals shared pathways. Hum Mol Genet. 16(14): Oh DY, Kim K, Kwon HB, Seong JY. (2006) Cellular and molecular biology of orphan G protein-coupled receptors. Int Rev Cytol. 252: Otter MH, Matto V, Soukand R, Skrebuhhova T. (1997) Characterization of rat exploratory behavior using the exploration box test. Meth Find Exp Clin Pharm. 19: Paxinos G. and Watson C. (1998) The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. 4th ed. Academic Press, San Diego. Trifonov S, Houtani T, Hamada S, Kase M, Maruyama M, Sugimoto T. (2009) In situ hybridization study of the distribution of choline acetyl transferase mrna and its splice variants in the mouse brain and spinal cord. Neuroscience 159: Trifonov S, Houtani T, Shimizu J-i, Hamada S, Kase M, Maruyama M, Sugimoto T. (2010) GPR155: Gene organization, multiple mrna splice variants and expression in mouse central nervous system. Biochem and Biophys Res Com 398:19-25 Trifonov S, Houtani T, Kase M, Toida K, Maruyama M, Yamashita Y, Shimizu J-i, Sugimoto T. (2012) Lateral regions of the rodent striatum reveal elevated glutamate decarboxylase 1 mrna expression in medium-sized projection neurons. Eur J. Of Neuros. 35: Vassilatis DK, Hohmann JG, Zeng H, Li F, Ranchalis JE, Mortrud MT, Brown A, Rodriguez SS, Weller JR, Wright AC, Bergmann JE, Gaitanaris GA. (2003) The G protein-coupled receptor repertoires of human and mouse. Proc Natl Acad Sci U S A. 100(8): Ma P, Zemmel R. (2002) Value of novelty? Nature reviews-drug Disc. 1: Viidatud projekti Newmood andmed: RNA hübridiseerimine toimus kompaniis ServiceXS Hollandis, Andmed normaliseeris ja statistilise andmeanalüüsi tegi Tim Hinsley Manchesteri ülikoolist. viimati alla laetud

27 10. Localization of orphan receptor GPR155 in rat brain with in situ hybridization Kaieli Tohvert Summary The aim of this study was to determine the localization of orphan receptor GPR155 in rat brain with in situ hybridization. In situ hybridization is based on complementary RNA binding to the GPR155 mrna. RNA probes are labeled with digoxygenin, which is later visualised by digoxygenin-binding antibody, which is conjugated to alkaline phosphatase. Localization of GPR155 mrna was found in these areas: hipocampus, cortex, around aqueduct, globus pallidus, optilic tract and indusium griseum. The strongest localization of GPR155 mrna was found in following areas: hipocampus and cerebellum. Results from this work were also compared to results from localization fo GPR155 protein by immunohistochemistry. As a result of this work GPR155 localization was described in different rat brain areas.. 27

28 11. Lisad Lisa 1: GPR155 geeni järjestus 28

29 12. Lihtlitsents lõputöö reprodutseerimiseks ja lõputöö üldsusele kättesaadavaks tegemiseks Mina Kaieli Tohvert (autori nimi) (sünnikuupäev: ) 1. annan Tartu Ülikoolile tasuta loa (lihtlitsentsi) enda loodud teose Orbretseptor GPR155 lokalisatsiooni määramine roti ajus in situ hübridisatsiooni abil, (lõputöö pealkiri) mille juhendaja on Ain Uustare, (juhendaja nimi) 1.1. reprodutseerimiseks säilitamise ja üldsusele kättesaadavaks tegemise eesmärgil, sealhulgas digitaalarhiivi DSpace-is lisamise eesmärgil kuni autoriõiguse kehtivuse tähtaja lõppemiseni; 1.2. üldsusele kättesaadavaks tegemiseks Tartu Ülikooli veebikeskkonna kaudu, sealhulgas digitaalarhiivi DSpace i kaudu kuni autoriõiguse kehtivuse tähtaja lõppemiseni. 2. olen teadlik, et punktis 1 nimetatud õigused jäävad alles ka autorile. 3. kinnitan, et lihtlitsentsi andmisega ei rikuta teiste isikute intellektuaalomandi ega isikuandmete kaitse seadusest tulenevaid õigusi. Tartus/Tallinnas/Narvas/Pärnus/Viljandis, pp.kk.aaaa Tartus

Microsoft PowerPoint - Roosimaa.ppt

Microsoft PowerPoint - Roosimaa.ppt ENERGEETILISES METABOLISMIS OSALEVATE GEENIDE EKSPRESSIOON MÜOKARDIS JA HL-1 RAKULIINIS Mart Roosimaa TÜ arstiteaduskond EESTI TEADUSTE AKADEEMIA ÜLIÕPILASTÖÖDE KONKURSI VÕITJATE KONVERENTS 2008 Südamelihas

Rohkem

PowerPoint Presentation

PowerPoint Presentation Pitt-Hopkinsi sündroomi modelleerimine Drosophila melanogaster is Laura Tamberg Juhendajad: Mari Palgi, PhD ja Tõnis Timmusk, PhD 27.10.2014 Drosophila melanogaster Üks esimesi mudelorganisme Thomas Hunt

Rohkem

Tartu Ülikool Loodus- ja tehnoloogiateaduskond Keemia Instituut Bakalaureusetöö Viiruslaadsete osakeste puhastamine ja detekteerimine Maksim Runin Juh

Tartu Ülikool Loodus- ja tehnoloogiateaduskond Keemia Instituut Bakalaureusetöö Viiruslaadsete osakeste puhastamine ja detekteerimine Maksim Runin Juh Tartu Ülikool Loodus- ja tehnoloogiateaduskond Keemia Instituut Bakalaureusetöö Viiruslaadsete osakeste puhastamine ja detekteerimine Maksim Runin Juhendaja: Prof.Ago Rinken Kaasjuhendaja: M.Sc. Oliver

Rohkem

Millest mõtleb depressioon (ja kuidas temast aru saada?) Maarja-Liisa Oitsalu kliiniline psühholoog

Millest mõtleb depressioon (ja kuidas temast aru saada?) Maarja-Liisa Oitsalu kliiniline psühholoog Millest mõtleb depressioon (ja kuidas temast aru saada?) Maarja-Liisa Oitsalu kliiniline psühholoog Ma olen mõttetu Jälle ma ebaõnnestusin! See ülesanne ei tulnud mul hästi välja Küll ma olen vahest saamatu!

Rohkem

Microsoft Word - Mesi, kestvuskatsed, doc

Microsoft Word - Mesi, kestvuskatsed, doc MEEPROOVIDE KESTVUSKATSED Tallinn 2017 Töö nimetus: Meeproovide kestvuskatsed. Töö autorid: Anna Aunap Töö tellija: Eesti Mesinike Liit Töö teostaja: Marja 4D Tallinn, 10617 Tel. 6112 900 Fax. 6112 901

Rohkem

Õppimine Anne Villems, Margus Niitsoo ja Konstantin Tretjakov

Õppimine Anne Villems, Margus Niitsoo ja Konstantin Tretjakov Õppimine Anne Villems, Margus Niitsoo ja Konstantin Tretjakov Kava Kuulame Annet Essed ja Felder Õppimise teooriad 5 Eduka õppe reeglit 5 Olulisemat oskust Anne Loeng Mida uut saite teada andmebaasidest?

Rohkem

Microsoft Word - Toetuste veebikaardi juhend

Microsoft Word - Toetuste veebikaardi juhend Toetuste veebikaardi juhend Toetuste veebikaardi ülesehitus Joonis 1 Toetuste veebikaardi vaade Toetuste veebikaardi vaade jaguneb tinglikult kaheks: 1) Statistika valikute osa 2) Kaardiaken Statistika

Rohkem

Microsoft PowerPoint - veinikaaritamine

Microsoft PowerPoint - veinikaaritamine Veini kääritamine Martin Sööt Käärimisprotsessi mõjutavad tegurid Temperatuur ja selle mõju veini kvaliteedile: Käärimine on eksotermiline protsess ja seetõttu eraldub käärimisel soojusenergiat punased

Rohkem

ArcGIS Online Konto loomine Veebikaardi loomine Rakenduste tegemine - esitlus

ArcGIS Online Konto loomine Veebikaardi loomine Rakenduste tegemine - esitlus PILVI TAUER Tallinna Tehnikagümnaasium ArcGIS Online 1.Konto loomine 2.Veebikaardi loomine 3.Rakenduste tegemine - esitlus Avaliku konto loomine Ava ArcGIS Online keskkond http://www.arcgis.com/ ning logi

Rohkem

PÄRNU TÄISKASVANUTE GÜMNAASIUM ESITLUSE KOOSTAMISE JUHEND Pärnu 2019

PÄRNU TÄISKASVANUTE GÜMNAASIUM ESITLUSE KOOSTAMISE JUHEND Pärnu 2019 PÄRNU TÄISKASVANUTE GÜMNAASIUM ESITLUSE KOOSTAMISE JUHEND Pärnu 2019 SISUKORD 1. SLAIDIESITLUS... 3 1.1. Esitlustarkvara... 3 1.2. Slaidiesitluse sisu... 3 1.3. Slaidiesitluse vormistamine... 4 1.3.1 Slaidid...

Rohkem

Matemaatilised meetodid loodusteadustes. I Kontrolltöö I järeltöö I variant 1. On antud neli vektorit: a = (2; 1; 0), b = ( 2; 1; 2), c = (1; 0; 2), d

Matemaatilised meetodid loodusteadustes. I Kontrolltöö I järeltöö I variant 1. On antud neli vektorit: a = (2; 1; 0), b = ( 2; 1; 2), c = (1; 0; 2), d Matemaatilised meetodid loodusteadustes I Kontrolltöö I järeltöö I variant On antud neli vektorit: a (; ; ), b ( ; ; ), c (; ; ), d (; ; ) Leida vektorite a ja b vaheline nurk α ning vekoritele a, b ja

Rohkem

Slide 1

Slide 1 Taimed ja sünteetiline bioloogia Hannes Kollist Plant Signal Research Group www.ut.ee/plants University of Tartu, Estonia 1. TAIMEDE roll globaalsete probleemide lahendamisel 2. Taimsete signaalide uurimisrühm

Rohkem

TARTU ÜLIKOOL LOODUS- JA TEHNOLOOGIATEADUSKOND MOLEKULAAR- JA RAKUBIOLOOGIA INSTITUUT ARENGUBIOLOOGIA ÕPPETOOL Laura Truu Wfs1 ja Grp94 ekspressiooni

TARTU ÜLIKOOL LOODUS- JA TEHNOLOOGIATEADUSKOND MOLEKULAAR- JA RAKUBIOLOOGIA INSTITUUT ARENGUBIOLOOGIA ÕPPETOOL Laura Truu Wfs1 ja Grp94 ekspressiooni TARTU ÜLIKOOL LOODUS- JA TEHNOLOOGIATEADUSKOND MOLEKULAAR- JA RAKUBIOLOOGIA INSTITUUT ARENGUBIOLOOGIA ÕPPETOOL Laura Truu Wfs1 ja Grp94 ekspressiooni sõltuvus glükoosi tasemest ja NMDA retseptori inhibeerimisest

Rohkem

EE - EP B1 IL-17A ja IL-17F antagonistid ja meetodid nende kasutamiseks TEHNIKA TASE Tsütokiinid on väikesed lahustuvad proteiini

EE - EP B1 IL-17A ja IL-17F antagonistid ja meetodid nende kasutamiseks TEHNIKA TASE Tsütokiinid on väikesed lahustuvad proteiini EE - EP1931697 B1 IL-17A ja IL-17F antagonistid ja meetodid nende kasutamiseks TEHNIKA TASE 5 10 15 20 25 Tsütokiinid on väikesed lahustuvad proteiinid, mis vahendavad erinevaid bioloogilisi toimeid, muu

Rohkem

Tartu Kutsehariduskeskus IKT osakond Merlis Karja-Kännaste ASUTUSE DOKUMENDIREGISTRI AVALIK VAADE Analüüs Juhendaja Mirjam-Merike Sõmer Tartu 2015

Tartu Kutsehariduskeskus IKT osakond Merlis Karja-Kännaste ASUTUSE DOKUMENDIREGISTRI AVALIK VAADE Analüüs Juhendaja Mirjam-Merike Sõmer Tartu 2015 Tartu Kutsehariduskeskus IKT osakond Merlis Karja-Kännaste ASUTUSE DOKUMENDIREGISTRI AVALIK VAADE Analüüs Juhendaja Mirjam-Merike Sõmer Tartu 2015 SISUKORD SISSEJUHATUS... 3 1. VILJANDI LINNAVALITSUSE

Rohkem

E-õppe ajalugu

E-õppe ajalugu Koolituskeskkonnad MTAT.03.142 avaloeng Anne Villems September 2014.a. Põhiterminid Koolituskeskkonnad (Learning environments) IKT hariduses (ICT in education) E-õpe (e-learning) Kaugõpe (distance learning)

Rohkem

ANOVA Ühefaktoriline dispersioonanalüüs Treeningu sagedus nädalas Kaal FAKTOR UURITAV TUNNUS Mitmemõõtmeline statistika Kairi Osula 2017/kevad

ANOVA Ühefaktoriline dispersioonanalüüs Treeningu sagedus nädalas Kaal FAKTOR UURITAV TUNNUS Mitmemõõtmeline statistika Kairi Osula 2017/kevad ANOVA Ühefaktoriline dispersioonanalüüs Treeningu sagedus nädalas Kaal FAKTOR UURITAV TUNNUS Factorial ANOVA Mitmefaktoriline dispersioonanalüüs FAKTOR FAKTOR Treeningu sagedus nädalas Kalorite kogus Kaal

Rohkem

Microsoft PowerPoint - Loodusteaduslik uurimismeetod.ppt

Microsoft PowerPoint - Loodusteaduslik uurimismeetod.ppt Bioloogia Loodusteaduslik uurimismeetod Tiina Kapten Bioloogia Teadus, mis uurib elu. bios - elu logos - teadmised Algselt võib rääkida kolmest teadusharust: Botaanika Teadus taimedest Zooloogia Teadus

Rohkem

Image segmentation

Image segmentation Image segmentation Mihkel Heidelberg Karl Tarbe Image segmentation Image segmentation Thresholding Watershed Region splitting and merging Motion segmentation Muud meetodid Thresholding Lihtne Intuitiivne

Rohkem

Microsoft PowerPoint - ainevahetus.ppt [Compatibility Mode]

Microsoft PowerPoint - ainevahetus.ppt [Compatibility Mode] Triin Marandi Tartu Forseliuse Gümnaasium EHK METABOLISM organismis toimuvad omavahel ja keskkonnaga seotud keemiliste reaktsioonide kogum erinevad orgaanilised ained väliskeskkonnast sünteesivad ise kehaomased

Rohkem

“MÄLUKAS”

“MÄLUKAS” Hiiumaa Arenguseminar 2016 Mälu ja mõtlemine Juhi tähelepanu Tauri Tallermaa 27.oktoober 2016 Edu 7 tunnust Allikas: Anthony Robbins. Sisemine jõud 1. Vaimustus 2. Usk e veendumus 3. Strateegia 4. Väärtushinnangute

Rohkem

Tromboos ja kuidas selle vastu võidelda

Tromboos ja  kuidas selle vastu võidelda Kasvaja Rasedus Geneetiline soodumus jne Endoteeli düsfunktsioon (trauma, ateroom) Op ravi Kateetrid, punktsioonid Rudolph Carl Virchow 1821 1902 Staas Immobilistatsioon Laienenud veenid Kasvaja Ülekaal

Rohkem

Väljaandja: Keskkonnaminister Akti liik: määrus Teksti liik: terviktekst Redaktsiooni jõustumise kp: Redaktsiooni kehtivuse lõpp:

Väljaandja: Keskkonnaminister Akti liik: määrus Teksti liik: terviktekst Redaktsiooni jõustumise kp: Redaktsiooni kehtivuse lõpp: Väljaandja: Keskkonnaminister Akti liik: määrus Teksti liik: terviktekst Redaktsiooni jõustumise kp: 0.02.2009 Redaktsiooni kehtivuse lõpp: 3.0.206 Avaldamismärge: Kiirgustegevuses tekkinud radioaktiivsete

Rohkem

loogikaYL_netis_2018_NAIDISED.indd

loogikaYL_netis_2018_NAIDISED.indd . Lihtne nagu AB Igas reas ja veerus peavad tähed A, B ja esinema vaid korra. Väljaspool ruudustikku antud tähed näitavad, mis täht on selles suunas esimene. Vastuseks kirjutage ringidesse sattuvad tähed

Rohkem

Sissejuhatus GRADE metoodikasse

Sissejuhatus GRADE metoodikasse Sissejuhatus GRADE metoodikasse Eriline tänu: Holger Schünemann ja GRADE working group www.gradeworkinggroup.org Kaja-Triin Laisaar TÜ peremeditsiini ja rahvatervishoiu instituut kaja-triin.laisaar@ut.ee

Rohkem

Tartu Ülikool

Tartu Ülikool Tartu Ülikool Code coverage Referaat Koostaja: Rando Mihkelsaar Tartu 2005 Sissejuhatus Inglise keelne väljend Code coverage tähendab eesti keeles otse tõlgituna koodi kaetust. Lahti seletatuna näitab

Rohkem

(Microsoft Word - T\366\366leht m\365isaprogramm 4-6 kl tr\374kkimiseks.doc)

(Microsoft Word - T\366\366leht m\365isaprogramm 4-6 kl tr\374kkimiseks.doc) 4-6 KLASS 1 Minu nimi on Ma olen praegu Täna on 1. KÄRNERIMAJA JA LILLED Kirjuta või joonista siia kolm kärneri tööriista Kirjuta siia selle taime nimi, 1. TÖÖRIIST 2. TÖÖRIIST 3. TÖÖRIIST mida istutasid

Rohkem

Microsoft Word - EVS_ISO_IEC_27001;2014_et_esilehed.doc

Microsoft Word - EVS_ISO_IEC_27001;2014_et_esilehed.doc EESTI STANDARD EVS-ISO/IEC 27001:2014 INFOTEHNOLOOGIA Turbemeetodid Infoturbe halduse süsteemid Nõuded Information technology Security techniques Information security management systems Requirements (ISO/IEC

Rohkem

II lisa Ravimi omaduste kokkuvõtte ja pakendi infolehe muudatused, esitatud Euroopa Ravimiameti poolt Käesolev ravimi omaduste kokkuvõte ja pakendi in

II lisa Ravimi omaduste kokkuvõtte ja pakendi infolehe muudatused, esitatud Euroopa Ravimiameti poolt Käesolev ravimi omaduste kokkuvõte ja pakendi in II lisa Ravimi omaduste kokkuvõtte ja pakendi infolehe muudatused, esitatud Euroopa Ravimiameti poolt Käesolev ravimi omaduste kokkuvõte ja pakendi infoleht on esildismenetluse tulemus. Vastavalt vajadusele

Rohkem

Kliinilise keemia uuringud, südamemarkerite uuringud lapsed Kompleksanalüüsi nimetus Analüüsi nimetus Lühend Referentsväärtused Vanus Sugu

Kliinilise keemia uuringud, südamemarkerite uuringud lapsed Kompleksanalüüsi nimetus Analüüsi nimetus Lühend Referentsväärtused Vanus Sugu Kliinilise keemia uuringud, südamemarkerite uuringud lapsed Analüüsi Alaniini aminotransferaas plasmas P-ALAT 7 17 a M/N < 37 U/L 1 6 a M/N < 29 U/L < 1 a M/N < 56 U/L Albumiin plasmas P-Alb 15 18 a M/N

Rohkem

Microsoft Word - HOTSEC kasutusjuhend v1.900.docx

Microsoft Word - HOTSEC kasutusjuhend v1.900.docx HOTSEC Tarkvara kasutusjuhend v. 1.9 1 Sisukord Käivitamine:... 3 Programmi kasutamine... 4 Kasutajate lisamine ja eemaldamine:... 6 Jooksev logi:... 9 Häired:... 9 2 HOTSEC põhioperatsioonide kirjeldus

Rohkem

Justiitsministri määrus nr 10 Euroopa tõkendi tunnistuse vormi kehtestamine Lisa EUROOPA TÕKENDI TUNNISTUS 1 Viidatud nõukogu raamotsuse 20

Justiitsministri määrus nr 10 Euroopa tõkendi tunnistuse vormi kehtestamine Lisa EUROOPA TÕKENDI TUNNISTUS 1 Viidatud nõukogu raamotsuse 20 Justiitsministri 26.03.2015 määrus nr 10 Euroopa tõkendi tunnistuse vormi kehtestamine Lisa EUROOPA TÕKENDI TUNNISTUS 1 Viidatud nõukogu raamotsuse 2009/829/JSK artiklis 10 a) Taotlev riik: Täitev riik:

Rohkem

Markina

Markina EUROOPA NOORTE ALKOHOLITARBIMISE PREVENTSIOONI PRAKTIKAD JA SEKKUMISED Anna Markina Tartu Ülikool Meie ülesanne on: Tuvastada ja välja valida erinevaid programme ja sekkumist, mida on hinnatud ja mille

Rohkem

KULUDOKUMENTIDE AUDITI ARUANNE

KULUDOKUMENTIDE AUDITI ARUANNE EUROOPA KALANDUSFONDI PROJEKTI NR 932010780004 KALAKOELMUTE SEISUND NING KOELMUALADE MELIOREERIMISE LÄHTEÜLESANNETE KOOSTAMINE TOIMINGUTE AUDIT TOETUSE SAAJA: TARTU ÜLIKOOL LÕPPARUANNE: 6.7-4/2016-006

Rohkem

loeng7.key

loeng7.key Grammatikate elustamine JFLAPiga Vesal Vojdani (TÜ Arvutiteaduse Instituut) Otse Elust: Java Spec https://docs.oracle.com/javase/specs/jls/se8/html/ jls-14.html#jls-14.9 Kodutöö (2. nädalat) 1. Avaldise

Rohkem

Sotsiaalministri 17. septembri a määrus nr 53 Tervise infosüsteemi edastatavate dokumentide andmekoosseisud ning nende säilitamise tingimused ja

Sotsiaalministri 17. septembri a määrus nr 53 Tervise infosüsteemi edastatavate dokumentide andmekoosseisud ning nende säilitamise tingimused ja Sotsiaalministri 17. septembri 2008. a määrus nr 53 Tervise infosüsteemi edastatavate dokumentide andmekoosseisud ning nende säilitamise tingimused ja kord Lisa 2 Statsionaarse epikriisi andmekoosseis

Rohkem

Document number:

Document number: WNR Kiirpaigaldusjuhend Lisateavet, juhised ja uuendused saab leida internetist aadressil http://www.a-link.com Kiirpaigaldusjuhend Komplekt sisaldab: - WNR repiiter - Paigaldusjuhend Ühendused / Ports:

Rohkem

Väljaandja: Vabariigi Valitsus Akti liik: määrus Teksti liik: algtekst-terviktekst Redaktsiooni jõustumise kp: Redaktsiooni kehtivuse lõpp:

Väljaandja: Vabariigi Valitsus Akti liik: määrus Teksti liik: algtekst-terviktekst Redaktsiooni jõustumise kp: Redaktsiooni kehtivuse lõpp: Väljaandja: Vabariigi Valitsus Akti liik: määrus Teksti liik: algtekst-terviktekst Redaktsiooni jõustumise kp: 01.06.2002 Redaktsiooni kehtivuse lõpp: 22.06.2002 Avaldamismärge: RT I 2000, 49, 314 Meditsiinilisel

Rohkem

G OSA A VARIANT RESPONDENDILE ISE TÄITMISEKS

G OSA A VARIANT RESPONDENDILE ISE TÄITMISEKS G OSA A VARIANT RESPONDENDILE ISE TÄITMISEKS GS1 Järgnevalt on kirjeldatud lühidalt mõningaid inimesi. Palun lugege iga kirjeldust ja märkige igale reale, kuivõrd Teie see inimene on. Väga Minu Mõnevõrra

Rohkem

Taskuprinter KASUTUSJUHEND

Taskuprinter KASUTUSJUHEND Taskuprinter KASUTUSJUHEND Täname, et ostsite taskuprinteri Polaroid Mint. Käesoleva kasutusjuhendi eesmärk on anda teile juhiseid toote ohutuks kasutamiseks ja et see ei kujutaks endast kasutajale mingit

Rohkem

vv05lah.dvi

vv05lah.dvi IMO 05 Eesti võistkonna valikvõistlus 3. 4. aprill 005 Lahendused ja vastused Esimene päev 1. Vastus: π. Vaatleme esiteks juhtu, kus ringjooned c 1 ja c asuvad sirgest l samal pool (joonis 1). Olgu O 1

Rohkem

lvk04lah.dvi

lvk04lah.dvi Lahtine matemaatikaülesannete lahendamise võistlus. veebruaril 004. a. Lahendused ja vastused Noorem rühm 1. Vastus: a) jah; b) ei. Lahendus 1. a) Kuna (3m+k) 3 7m 3 +7m k+9mk +k 3 3M +k 3 ning 0 3 0,

Rohkem

CE¤

CE¤ HER2 IQFISH pharmdx (Dako Omnis) Kood GM333 2. redaktsioon HER2 IQFISH pharmdx (Dako Omnis) on otsese in situ fluorestsentshübridiseerimisega (FISH) analüüs, mis on mõeldud HER2 geeni amplifikatsiooni

Rohkem

Microsoft PowerPoint - loeng2.pptx

Microsoft PowerPoint - loeng2.pptx Kirjeldavad statistikud ja graafikud pidevatele tunnustele Krista Fischer Pidevad tunnused ja nende kirjeldamine Pidevaid (tihti ka diskreetseid) tunnuseid iseloomustatakse tavaliselt kirjeldavate statistikute

Rohkem

my_lauluema

my_lauluema Lauluema Lehiste toomisel A. Annisti tekst rahvaluule õhjal Ester Mägi (1983) Soran Alt q = 144 Oh se da ke na ke va de ta, ae ga i lust üü ri kes ta! üü ri kes ta! 3 Ju ba on leh tis lei na kas ke, hal

Rohkem

Sihtuuring Joogivee kvaliteedi ja terviseohutuse hindamine salvkaevudes ja isiklikes veevärkides (Järvamaa ja Jõgevamaa) Sotsiaalministri

Sihtuuring Joogivee kvaliteedi ja terviseohutuse hindamine salvkaevudes ja isiklikes veevärkides (Järvamaa ja Jõgevamaa) Sotsiaalministri Sihtuuring Joogivee kvaliteedi ja terviseohutuse hindamine salvkaevudes ja isiklikes veevärkides (Järvamaa ja Jõgevamaa) Sotsiaalministri 06.02.2015. käskkirjaga nr 18 Sotsiaalministeeriumi osakondade

Rohkem

Microsoft Word - RVLi juhend.doc

Microsoft Word - RVLi juhend.doc KINNITATUD peadirektori 23. mai 2008.a käskkirjaga nr 32 I. ÜLDSÄTTED EESTI RAHVUSRAAMATUKOGU RAAMATUKOGUDEVAHELISE LAENUTUSE JUHEND 1. Käesolev juhend sätestab raamatukogudevahelise laenutuse (edaspidi

Rohkem

PowerPoint Presentation

PowerPoint Presentation [ hübridiseerimisoligod ja PCR praimerid ] Proov (hübridiseerimisoligod) homogeenne, standardselt märgitult lahuses Target otsitavad nukleiinhappe järjestused, heterogeenne, märkimata tahkel kandjal Hübridiseerimistehnika

Rohkem

Võistlusülesanne Vastutuulelaev Finaal

Võistlusülesanne Vastutuulelaev Finaal Võistlusülesanne Vastutuulelaev Finaal CADrina 2016 võistlusülesannete näol on tegemist tekst-pilt ülesannetega, milliste lahendamiseks ei piisa ainult jooniste ülevaatamisest, vaid lisaks piltidele tuleb

Rohkem

Microsoft PowerPoint - Keskkonnamoju_rus.ppt

Microsoft PowerPoint - Keskkonnamoju_rus.ppt Keskkonnakonverents 07.01.2011 Keskkonnamõju hindamine ja keskkonnamõju strateegiline hindamine on avalik protsess kuidas osaleda? Elar Põldvere (keskkonnaekspert, Alkranel OÜ) Kõik, mis me õpime täna,

Rohkem

Microsoft Word - Karu 15 TERMO nr 527.doc

Microsoft Word - Karu 15 TERMO nr 527.doc Termoülevaatus nr.57 (57/1. Märts 8) Hoone andmed Aadress Lühikirjeldus Karu 15, Tallinn Termopildid Kuupäev 6.1.8 Tuule kiirus Õhutemperatuur -1,1 o C Tuule suund Osalesid Kaamera operaator Telefoni nr.

Rohkem

Keemia koolieksami näidistöö

Keemia koolieksami näidistöö PÕLVA ÜHISGÜMNAASIUMI KEEMIA KOOLIEKSAM Keemia koolieksami läbiviimise eesmärgiks on kontrollida gümnaasiumilõpetaja keemiaalaste teadmiste ja oskuste taset kehtiva ainekava ulatuses järgmistes valdkondades:

Rohkem

Slide 1

Slide 1 Hiiumaa Mesinike Seltsing Mesilasperede talvitumine, soojusrežiim ja ainevahetus talvel Uku Pihlak Tänast üritust toetab Euroopa Liit Eesti Mesindusprogrammi raames Täna räägime: Natuke füüsikast ja keemiast

Rohkem

Non-pharmacological treatment

Non-pharmacological treatment Siinusrütmi säilitava ravimi valik Kliiniline küsimus Kas siinusrütmi säilitavaks raviks tuleks eelistada mõnd konkreetset ravimirühma/ravimit: BBL vs Ic vs III? Olulised tulemusnäitajad Surm, ajuinfarkt,

Rohkem

raamat5_2013.pdf

raamat5_2013.pdf Peatükk 5 Prognoosiintervall ja Usaldusintervall 5.1 Prognoosiintervall Unustame hetkeks populatsiooni parameetrite hindamise ja pöördume tagasi üksikvaatluste juurde. On raske ennustada, milline on huvipakkuva

Rohkem

EESTI STANDARD EVS-EN ISO 3381:2007 See dokument on EVS-i poolt loodud eelvaade RAUDTEEALASED RAKENDUSED Akustika Raudteeveeremi sisemüra mõõtmine (IS

EESTI STANDARD EVS-EN ISO 3381:2007 See dokument on EVS-i poolt loodud eelvaade RAUDTEEALASED RAKENDUSED Akustika Raudteeveeremi sisemüra mõõtmine (IS EESTI STANDARD RAUDTEEALASED RAKENDUSED Akustika Raudteeveeremi sisemüra mõõtmine Railway applications Acoustics Measurement of noise inside railbound vehicles EESTI STANDARDIKESKUS EESTI STANDARDI EESSÕNA

Rohkem

Load Ehitise kasutusluba Ehitusseaduse kohaselt võib valminud ehitist või selle osa kasutada vaid ettenähtud otstarbel. Kasutamise

Load Ehitise kasutusluba Ehitusseaduse kohaselt võib valminud ehitist või selle osa kasutada vaid ettenähtud otstarbel. Kasutamise 3. 3. Ehitise kasutusluba Ehitusseaduse kohaselt võib valminud ehitist või selle osa kasutada vaid ettenähtud otstarbel. Kasutamise otstarve märgitakse kasutusloale. ehitise kasutusluba Erandlikult ei

Rohkem

ANDMEKAITSE INSPEKTSIOON Valvame, et isikuandmete kasutamisel austatakse eraelu ning et riigi tegevus oleks läbipaistev ISIKUANDMETE KAITSE EEST VASTU

ANDMEKAITSE INSPEKTSIOON Valvame, et isikuandmete kasutamisel austatakse eraelu ning et riigi tegevus oleks läbipaistev ISIKUANDMETE KAITSE EEST VASTU ANDMEKAITSE INSPEKTSIOON Valvame, et isikuandmete kasutamisel austatakse eraelu ning et riigi tegevus oleks läbipaistev ISIKUANDMETE KAITSE EEST VASTUTAV ISIK Juhend kehtestatakse isikuandmete kaitse seaduse

Rohkem

MS Word Sisukord Uue dokumendi loomine... 2 Dokumendi salvestamine... 3 Faili nimi... 4 Teksti sisestamine... 6 Klaviatuuril mitteleiduvat sümbolite l

MS Word Sisukord Uue dokumendi loomine... 2 Dokumendi salvestamine... 3 Faili nimi... 4 Teksti sisestamine... 6 Klaviatuuril mitteleiduvat sümbolite l MS Word Sisukord Uue dokumendi loomine... 2 Dokumendi salvestamine... 3 Faili nimi... 4 Teksti sisestamine... 6 Klaviatuuril mitteleiduvat sümbolite lisamine... 6 Uue dokumendi loomine Dokumendi salvestamine

Rohkem

Microsoft Word - Errata_Andmebaaside_projekteerimine_2013_06

Microsoft Word - Errata_Andmebaaside_projekteerimine_2013_06 Andmebaaside projekteerimine Erki Eessaar Esimene trükk Teadaolevate vigade nimekiri seisuga 24. juuni 2013 Lehekülg 37 (viimane lõik, teine lause). Korrektne lause on järgnev. Üheks tänapäeva infosüsteemide

Rohkem

Vulkan Lokring kliimasüsteemi remondi tarvikud. Liitmik alumiiniumtoru jätkamiseks. Liitmik alumiiniumtoru jätkamiseks. Liitmik vooliku jätkamiseks. L

Vulkan Lokring kliimasüsteemi remondi tarvikud. Liitmik alumiiniumtoru jätkamiseks. Liitmik alumiiniumtoru jätkamiseks. Liitmik vooliku jätkamiseks. L Vulkan Lokring kliimasüsteemi remondi tarvikud. Liitmik alumiiniumtoru jätkamiseks. Liitmik alumiiniumtoru jätkamiseks. Liitmik vooliku jätkamiseks. L13001393 Ø 8 mm 7.- L13001443 Ø 9,53 8 mm 7.- L13004219

Rohkem

Pintsli otsade juurde tegemine Esiteks Looge pilt suurusega 64x64 ja tema taustaks olgu läbipaistev kiht (Transparent). Teiseks Minge kihtide (Layers)

Pintsli otsade juurde tegemine Esiteks Looge pilt suurusega 64x64 ja tema taustaks olgu läbipaistev kiht (Transparent). Teiseks Minge kihtide (Layers) Pintsli otsade juurde tegemine Esiteks Looge pilt suurusega 64x64 ja tema taustaks olgu läbipaistev kiht (Transparent). Teiseks Minge kihtide (Layers) aknasse ja looge kaks läbipaistvat kihti juurde. Pange

Rohkem

AASTAARUANNE

AASTAARUANNE 2014. 2018. aasta statistikatööde loetelu kinnitamisel juunis 2014 andis Vabariigi Valitsus Statistikaametile ja Rahandusle korralduse (valitsuse istungi protokolliline otsus) vaadata koostöös dega üle

Rohkem

B120_10 estonian.cdr

B120_10 estonian.cdr Alati seal, et teid aidata Registreerige oma toode ja otsige abi koduleheküljelt www.philips.com/welcome B120 Beebimonitor Küsimus? Kontakteeruge Philipsiga Eestikeelne kasutusjuhend 2 Valgussensor USB

Rohkem

Relatsiooniline andmebaaside teooria II. 6. Loeng

Relatsiooniline andmebaaside teooria II. 6. Loeng Relatsiooniline andmebaaside teooria II. 5. Loeng Anne Villems ATI Loengu plaan Sõltuvuste pere Relatsiooni dekompositsioon Kadudeta ühendi omadus Sõltuvuste pere säilitamine Kui jõuame, siis ka normaalkujud

Rohkem

G4S poolt võetavad kohustused 1. G4S juurutab oma hinnastamispõhimõtetes käesolevale dokumendile lisatud hinnastamismaatriksi. Hinnastamismaatriks läh

G4S poolt võetavad kohustused 1. G4S juurutab oma hinnastamispõhimõtetes käesolevale dokumendile lisatud hinnastamismaatriksi. Hinnastamismaatriks läh G4S poolt võetavad kohustused 1. G4S juurutab oma hinnastamispõhimõtetes käesolevale dokumendile lisatud hinnastamismaatriksi. Hinnastamismaatriks lähtub järgmistest põhimõtetest. a. Hinnastamismaatriks

Rohkem

1. Üliõpilased 1.1 Tõendid Vali menüüst: Üliõpilased tõendid tõendite trükkimine. Avaneb vorm Tõendite trükkimine, vali tõendi liik Tõend õppim

1. Üliõpilased 1.1 Tõendid Vali menüüst: Üliõpilased tõendid tõendite trükkimine. Avaneb vorm Tõendite trükkimine, vali tõendi liik Tõend õppim 1. Üliõpilased 1.1 Tõendid Vali menüüst: Üliõpilased tõendid tõendite trükkimine. Avaneb vorm Tõendite trükkimine, vali tõendi liik. 1.1.1 Tõend õppimise kohta TLÜ-s Seda tõendiliiki saab väljastada ainult

Rohkem

Traneksaam_ortopeedias

Traneksaam_ortopeedias Traneksaamhape kasutamine Juri Karjagin Tartu Ülikool Tartu Ülikooli Kliinikum Plaan Fibrinolüüsist Traneksaamhape farmakoloogiast Traneksaamhape uuringud Plaaniline kirurgia Erakorraline trauma Toopiline

Rohkem

4. KIRURGIA Üliõpilase andmed. Need väljad täidab üliõpilane Praktikatsükli sooritamise aeg Kirurgia praktikatsükkel Ees- ja perekonnanimi Matriklinum

4. KIRURGIA Üliõpilase andmed. Need väljad täidab üliõpilane Praktikatsükli sooritamise aeg Kirurgia praktikatsükkel Ees- ja perekonnanimi Matriklinum 4. KIRURGIA Üliõpilase andmed. Need väljad täidab üliõpilane Praktikatsükli sooritamise aeg Kirurgia praktikatsükkel Ees- ja perekonnanimi Matriklinumber E-posti aadress Telefoninumber Praktikatsükli läbimine.

Rohkem

EMA_2011_ _ET_TRA

EMA_2011_ _ET_TRA II LISA Euroopa Ravimiameti esitatud teaduslikud järeldused ning positiivse arvamuse alused 1 Teaduslikud järeldused Docetaxel Teva Genrics ja sarnaste nimetuste (vt I lisa) teadusliku hindamise üldkokkuvõte

Rohkem

Slide 1

Slide 1 Tandeemsete korduste leidmise programme Triinu Kõressaar 10.11.2004 Kordusjärjestused (1): -Hajuskordusjärjestused SINE LINE LTR transposoonid pseudogeenid segmentide duplikatsioonid Kordusjärjestused

Rohkem

Microsoft PowerPoint - Niitmise_tuv_optiline_ja_radar.pptx

Microsoft PowerPoint - Niitmise_tuv_optiline_ja_radar.pptx Ettekanne ESTGIS aastakonverentsil 30.11.2012 Niidetud alade tuvastamine multispektraalsete ja radarsatelliidipiltide põhjal Kaupo Voormansik Sisukord 1. Eksperiment 2012 suvel multispektraalsete mõõtmiste

Rohkem

PowerPoint Presentation

PowerPoint Presentation Miks liituda projektiga LIFE Fit for REACH? Karin Viipsi Henkel Balti OÜ (Henkel Makroflex AS) Infopäev ettevõtetele, 09.11.2016 Sisukord Ettevõtte tutvustus Ettevõtte eesmärk projektis Mida on varasemalt

Rohkem

EBSCO täistekstiandmebaaside kasutamine Otsingu sooritamiseks: 1. Logi sisse 2. Vali EBSCOhost Web 3. Seejärel vali andmebaas, milles soovid otsingut

EBSCO täistekstiandmebaaside kasutamine Otsingu sooritamiseks: 1. Logi sisse 2. Vali EBSCOhost Web 3. Seejärel vali andmebaas, milles soovid otsingut EBSCO täistekstiandmebaaside kasutamine Otsingu sooritamiseks: 1. Logi sisse 2. Vali EBSCOhost Web 3. Seejärel vali andmebaas, milles soovid otsingut sooritada. Andmebaasid on temaatilised. Koolitööde

Rohkem

Häälestusutiliit Kasutusjuhend

Häälestusutiliit Kasutusjuhend Häälestusutiliit Kasutusjuhend Autoriõigus 2007, 2008 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Windows on Microsoft Corporationi USAs registreeritud kaubamärk. Käesolevas dokumendis sisalduvat teavet

Rohkem

Microsoft Word - TallinnLV_lihtsustatud_manual_asutuse_juhataja_ doc

Microsoft Word - TallinnLV_lihtsustatud_manual_asutuse_juhataja_ doc Tallinna Linnavalitsuse sõnumisaatja kasutusjuhend asutuse juhatajale Sisukord 1. Süsteemi sisenemine...2 2. Parooli lisamine ja vahetamine...2 3. Ametnike lisamine ametiasutuse juurde...2 4. Saatjanimede

Rohkem

MAKSETERMINALI KASUTUSJUHEND

MAKSETERMINALI KASUTUSJUHEND MAKSETERMINALI KASUTUSJUHEND DESK/3200 Kliendiabi: 6711 444 (kõik nädalapäevad 24 h) Makseterminalide osakond: 6711 411 (tööpäeviti kell 9.00 17.00) Faks: 6 711 420 e-mail: posgrupp@estcard.ee N e t s

Rohkem

loeng2

loeng2 Automaadid, keeled, translaatorid Kompilaatori struktuur Leksiline analüüs Regulaaravaldised Leksiline analüüs Süntaks analüüs Semantiline analüüs Analüüs Masinkoodi genereerimine Teisendamine (opt, registrid)

Rohkem

PowerPoint Presentation

PowerPoint Presentation Kick-off 30.06.2014 Toetuse kasutamise leping Kadri Klaos 30.06.2014 Lepingu struktuur Eritingimused Üldtingimused Lisa I, Projekti sisukirjeldus Lisa II, Projekti eelarve Lisa III, Projekti rahastamis-

Rohkem

Pimeda ajal sõitmine

Pimeda ajal sõitmine Sõidueksamitel tehtud vead www.mnt.ee 1 Vasakpöörde sooritamine Sõiduteel paiknemine. Enne vasak- või tagasipööret peab juht aegsasti suunduma sõidutee pärisuunavööndi vasaku ääre lähedale või selle pöörde

Rohkem

MÄÄRUS nr 18 Välisvärbamise toetuse taotlemise ja kasutamise tingimused ning kord Määrus kehtestatakse riigieelarve seaduse 53 1 lõike 1 al

MÄÄRUS nr 18 Välisvärbamise toetuse taotlemise ja kasutamise tingimused ning kord Määrus kehtestatakse riigieelarve seaduse 53 1 lõike 1 al MÄÄRUS 19.04.2018 nr 18 Välisvärbamise toetuse taotlemise ja kasutamise tingimused ning kord Määrus kehtestatakse riigieelarve seaduse 53 1 lõike 1 alusel. 1. peatükk Üldsätted 1. Välisvärbamise toetuse

Rohkem

Sorb_LC_Est.smu

Sorb_LC_Est.smu Meetod baseerub Põhjamaade Toiduanalüüsi Komitee (Nordic Committee of Food Analyses) standardil nr. 124(87) KASUTUSALA: Bensoehappe ja sorbiinhappe määramine, mis on lisatud toiduainetele konservandina.

Rohkem

Antennide vastastikune takistus

Antennide vastastikune takistus Antennide vastastikune takistus Eelmises peatükis leidsime antenni kiirgustakistuse arvestamata antenni lähedal teisi objekte. Teised objektid, näiteks teised antennielemendid, võivad aga mõjutada antenni

Rohkem

PowerPoint Presentation

PowerPoint Presentation SUVISE RUUMITEMPERATUURI KONTROLL METOODIKA UUENDUSED Raimo Simson 23.04.19 MÕNED FAKTID Viimase 50 aastaga on Eesti suve keskmine temperatuur tõusnud ca 1.5K Aasta maksimumtemperatuurid on tõusnud ca

Rohkem

G aiasoft Programmi VERP ja Omniva Arvekeskuse liidese häälestamine ja arvete saatmine-lugemine VERP 6.3 ja VERP 6.3E Versioon ja hilisemad K

G aiasoft Programmi VERP ja Omniva Arvekeskuse liidese häälestamine ja arvete saatmine-lugemine VERP 6.3 ja VERP 6.3E Versioon ja hilisemad K Programmi VERP ja Omniva Arvekeskuse liidese häälestamine ja arvete saatmine-lugemine VERP 6.3 ja VERP 6.3E Versioon 6.3.1.51 ja hilisemad Kasutaja juhend 2016 Sisukord 1. Sissejuhatus...3 2. Liidese häälestus...3

Rohkem

Sisukord

Sisukord TARTU ÜLIKOOL BIOLOOGIA-GEOGRAAFIATEADUSKOND MOLEKULAAR- JA RAKUBIOLOOGIA INSTITUUT BIOINFORMAATIKA ÕPPETOOL Priit Palta Hübridiseerimisproovide disaini metoodika geeni koopiaarvu määramiseks Bakalaureusetöö

Rohkem

ITK ettekande põhi

ITK ettekande põhi Kodade virvendusarütmia antitrombootiline ravi Heli Kaljusaar 2009 NB! Loeng on autori omand ja kaitstud autoriõiguse seadusega. Loengut võite kasutada isiklikukeks vajadusteks. Loengu reprodutseerimisel

Rohkem

Ülesanne #5: Käik objektile Kooli ümberkujundamist vajava koha analüüs. Ülesanne #5 juhatab sisse teise poole ülesandeid, mille käigus loovad õpilased

Ülesanne #5: Käik objektile Kooli ümberkujundamist vajava koha analüüs. Ülesanne #5 juhatab sisse teise poole ülesandeid, mille käigus loovad õpilased Ülesanne #5: Käik objektile Kooli ümberkujundamist vajava koha analüüs. Ülesanne #5 juhatab sisse teise poole ülesandeid, mille käigus loovad õpilased oma kujunduse ühele kohale koolis. 5.1 Kohavalik Tiimi

Rohkem

Uudiseid k-meride abil bakterite leidmisest [Compatibility Mode]

Uudiseid k-meride abil bakterite leidmisest [Compatibility Mode] Uudiseid k-meride abil bakterite leidmisest CLARK: fast and accurate classification of metagenomic and genomic sequences using discriminative k-mers(2015) Rachid Ounit, Steve Wanamaker, Timothy J. Close

Rohkem

IGA ravitulemuse saavutamine ON PÕHJUS TÄHISTAMISEKS Varajase ja olulise molekulaarse ravivastuse saavutamine tähendab seda, et teie Ph+ KML allub rav

IGA ravitulemuse saavutamine ON PÕHJUS TÄHISTAMISEKS Varajase ja olulise molekulaarse ravivastuse saavutamine tähendab seda, et teie Ph+ KML allub rav IGA ravitulemuse saavutamine ON PÕHJUS TÄHISTAMISEKS Varajase ja olulise molekulaarse ravivastuse saavutamine tähendab seda, et teie Ph+ KML allub ravile. 1-3 Vaadake, mida saate oma järgmise ravivastuse

Rohkem

HÜPER IGM SÜNDROOM Publikatsioon oli võimalik tänu CSL Behring üldisele koolitusgrantile

HÜPER IGM SÜNDROOM Publikatsioon oli võimalik tänu CSL Behring üldisele koolitusgrantile HÜPER IGM SÜNDROOM Publikatsioon oli võimalik tänu CSL Behring üldisele koolitusgrantile HÜPER IGM SÜNDROOM See brosüür on ette nähtud patsientidele ja nende perekondadele ja ei asenda kliinilise immunoloogi

Rohkem

Materjaliõpetuse ja keemia lõimimine õppetöös.

Materjaliõpetuse ja keemia lõimimine õppetöös. Materjaliõpetuse ja keemia lõimimine õppetöös. Moonika Ints, Jelena Vill Tallinna Tööstushariduskeskus Õpiväljund Tunneb tekstiilkiudude liike, omadusi ja struktuuritüüpe ning tekstiilmaterjalide tootmisprotsessi.

Rohkem

PowerPointi esitlus

PowerPointi esitlus Konverents Terve iga hinna eest, 07.03.2013 Tervis ja haigus muutuvas maailmas Andres Soosaar Mis on meditsiin? Meditsiin on pikka aega olnud ruum, mille koordinaattelgedeks on tervise-haiguse eristus

Rohkem

Tala dimensioonimine vildakpaindel

Tala dimensioonimine vildakpaindel Tala dimensioonimine vildakpaindel Ülesanne Joonisel 9 kujutatud okaspuidust konsool on koormatud vertikaaltasandis ühtlase lauskoormusega p ning varda teljega risti mõjuva kaldjõuga (-jõududega) F =pl.

Rohkem

Histology FISH Accessory Kit Kood K versioon Fluorestsents in situ hübridisatsiooniks (FISH) formaliini fikseeritud parafiini kastetud koelõiku

Histology FISH Accessory Kit Kood K versioon Fluorestsents in situ hübridisatsiooniks (FISH) formaliini fikseeritud parafiini kastetud koelõiku Histology FISH Accessory Kit Kood K5799 7. versioon Fluorestsents in situ hübridisatsiooniks (FISH) formaliini fikseeritud parafiini kastetud koelõikudel. Komplekt sisaldab reaktiive 20 testi jaoks. P04094EE_03/K579911-2

Rohkem

Praks 1

Praks 1 Biomeetria praks 6 Illustreeritud (mittetäielik) tööjuhend Eeltöö 1. Avage MS Excel is ankeedivastuseid sisaldav andmestik, 2. lisage uus tööleht, nimetage see ümber leheküljeks Praks6 ja 3. kopeerige

Rohkem

rp_ IS_3

rp_ IS_3 Page 1 of 5 Üldine informatsioon Kummelitee Exemption Flags Toote nimi Exempt from Artwork Exempt from NEP Reporting Country Lipton Brand Name CAMOMILE Product Name Legal Description Country Kummelitee

Rohkem